黑羽番鸭成肌细胞的分离培养与鉴定

来源：江苏农业科学杂志2023年第第24期北京时间：

作者：王丽;王锋超;张玲;王洁;董飚;王军;陈嘉皓;王健

单位：1.江苏农牧科技职业学院，江苏泰州 225300； 2.江苏省南京市六合区竹镇镇畜牧兽医站，江苏南京 211501；3.国家水禽基因库(江苏)，江苏泰州 225300； 4.泰州第二中学，江苏泰州 225300

摘要：为建立番鸭成肌细胞体外分离培养和鉴定体系，选取不同胚龄黑羽番鸭为材料，利用Ⅱ型胶原酶和胰酶消化鸭胚腿肌获得成肌细胞，再经过3次差速贴壁进一步纯化，最后采用含2%马血清的培养基对分离纯化的成肌细胞进行分化诱导，结合细胞形态的观察、成肌细胞增殖期及分化期的标志基因的表达情况的检测鉴定分离的成肌细胞。结果显示，分离纯化得到的成肌细胞在贴壁后呈现纺锤形，进行分化处理后出现细胞融合。从E17鸭胚腿肌中获得的成肌细胞较E15、E16和E18中分离培养的效果更好，且经差速贴壁法纯化后大部分细胞中均检测到标志基因Desmin的表达，表明纯化后成肌细胞纯度较好。成肌细胞诱导分化处理48 h后，成肌调控因子MyoD的表达显著上调；成肌细胞增殖期特异性表达的Myf5显著性降低；分化期特异性表达的基因MyHC、MyoG以及MRF4均显著性增加。综上所述，本试验成功分离和鉴定了黑羽番鸭成肌细胞，可为研究番鸭肌肉发育和分子调控机制提供参考。

关键词：黑羽番鸭;成肌细胞;细胞分离培养;细胞分化;细胞鉴定