黄胸蓟马化学感受蛋白基因ThawCSP1克隆与表达分析

来源：江苏农业科学杂志2023年第第19期北京时间：

作者：李恒;张祥琴;田厚军;陈艺欣;林硕;魏辉;陈勇

单位：1.福建省农业科学院植物保护研究所/福建省作物有害生物监测与治理重点实验室/农业农村部福州作物有害生物科学观测实验站，福建福州 350013； 2.福建农林大学闽台作物有害生物生态防控国家重点实验室，福建福州 350002

摘要：化学感受蛋白(chemosensory proteins，简称CSPs)除了具有感知化学分子的功能，还与昆虫个体生长与发育、生殖、杀虫剂抗性等密切相关。黄胸蓟马(Thrips hawaiiensis)广泛分布于亚洲热带、亚热带和北美南部，是一种重要的农业和园艺作物害虫。本研究克隆鉴定了黄胸蓟马化学感受蛋白基因ThawCSP1开放阅读框(ORF)，然后利用MEGA 7.0软件以邻接法构建ThawCSP1系统发育树，最后利用RT-qPCR、免疫荧光、免疫电镜技术，从mRNA和蛋白水平分析黄胸蓟马ThawCSP1基因的表达情况。结果表明，黄胸蓟马ThawCSP1基因(GenBank登录号：OQ730210)ORF为405 bp，编码134个氨基酸，预测蛋白分子量为15.181 ku。分子进化树显示ThawCSP1与同属缨翅目的西花蓟马、花蓟马和牛角花齿蓟马CSPs序列同源性分别为79.55%、80.30%、76.52%。ThawCSP1基因在黄胸蓟马各个发育阶段均有表达，其中羽化1、5、10 d的成虫相对表达量最高，其次是1龄、2龄若虫和羽化15 d的成虫，蛹期的表达量最低；在黄胸蓟马成虫不同组织中，ThawCSP1表达量最高的是触角，其次是足和头部，分别是腹部表达量的22233、181.60、79.03倍。免疫荧光和免疫电镜观察也表明，ThawCSP1蛋白在黄胸蓟马触角高表达。研究结果将为解析ThawCSP1基因功能提供试验依据，也为基于昆虫CSPs研发高效引诱剂提供了理论依据。

关键词：黄胸蓟马;化学感受蛋白;表达谱;免疫荧光;免疫电镜