小麦白粉菌BgtVosA、BgtVelB、BgtBrlA基因的克隆及在调控无性繁殖中的作用

来源：江苏农业科学杂志2023年第第16期北京时间：

作者：曾凡松1; 翟亚美1; 袁斌1; 龚双军1; 向礼波1; 薛敏峰1; 阙亚伟1; 史文琦1; 郑磊2; 张强2; 杨立军1; 喻大昭1

单位：1.农业农村部华中作物有害生物综合治理重点实验室/农作物重大病虫草害防控湖北省重点实验室/湖北省农业科学院植保土肥研究所，湖北武汉 430064； 2.山东金正大生态工程集团股份有限公司，山东临沂 276700

摘要：为了明晰小麦白粉菌BgtVosA、BgtVelB、BgtBrlA基因的序列特点及它们在白粉菌产孢过程中的表达动态，为解析velvet蛋白在调控白粉菌无性繁殖中的作用提供理论依据，采用基于RNA-seq数据的克隆测序技术获得BgtVosA、BgtVelB、BgtBrlA基因的CDS序列，用生物信息学方法分析它们编码的蛋白质序列特征和空间结构，用RT-qPCR监测它们在白粉菌分生孢子形成时期的表达模式。结果表明，BgtVosA、BgtVelB、BgtBrlA基因的ORF长度依次为1470、1341、1143 bp，分别编码489、446、380个氨基酸，分子量在54.0~48.0 ku，属于碱性、亲水性、热不稳定蛋白质，均含有核定位信号，不含跨膜螺旋和信号肽，空间结构呈现出近球形。BgtVosA、BgtVelB、BgtBrlA分别与其他真菌来源的VosA、VelB、BrlA蛋白具有同源性，且与白粉菌同源蛋白具有更近的亲缘关系，氨基酸序列在白粉菌自然群体中均高度保守。BgtVosA、BgtVelB属于典型的velvet蛋白家族成员，可能通过分子互作形成复合物，但其结构与构巢曲霉同源蛋白复合物存在明显差异。在小麦白粉菌无性繁殖阶段，BgtVosA、BgtVelB基因均显著上调(P<0.01)，BgtBrlA表达水平没有显著变化(P>0.05)。 DNA结合区域分析推测BgtVosA-BgtVelB复合物不能靶向BgtBrlA启动子，调控其BgtBrlA的表达。BgtVosA、BgtVelB基因在调控白粉菌无性生殖中起重要作用。

关键词：小麦白粉菌;Velvet蛋白;BrlA基因'BrlA基因;无性产孢;表达分析