转HaNAC基因棉花的分子鉴定及遗传稳定性分析

来源：江苏农业科学杂志2023年第第15期北京时间：

作者：冯翠珍;郭亚萍;郑巨云;郑凯;陈全家;陈琴;曲延英

单位：1.新疆农业大学农学院/棉花教育部工程研究中心，新疆乌鲁木齐 830052； 2.新疆农业科学院经济作物研究所，新疆乌鲁木齐 830052

摘要：棉花是世界上重要的经济作物之一。为创制和改良棉花抗旱新品种提供种质资源及遗传育种研究提供理论依据，通过染色体步移技术明确外源基因在棉花染色体上的插入位点、序列及染色体信息，研究了转梭梭HaNAC基因的棉花材料对干旱胁迫的响应能力，确定了HaNAC基因的物理位置，鉴定了其遗传稳定性。研究结果如下：(1)本研究对转HaNAC38转录因子基因棉花材料进行了分子鉴定，通过PCR扩增、电泳检测及测序证实了转基因植株中分别存在标记基因和目的基因序列。应用半定量PCR，证明了HaNAC38基因在棉花受干旱胁迫后表达量上调。这些结果说明转HaNAC38基因T6代棉花植株的遗传稳定性。(2)通过标记基因的初步筛选获得阳性植株后，对转基因棉花进行外源基因的检测鉴定，利用获得的序列设计染色体步移引物，通过巢式PCR方法获得转HaNAC38基因棉花的 T-DNA 序列在基因组中的插入位置，结果定位到棉花基因组A11染色体第26 202 323 bp处。根据已知的棉花基因组信息，通过鉴定，共筛选转HaNAC38基因的棉花材料5个株系，为创制和改良棉花抗旱新品种提供了亲本材料。

关键词：棉花;转基因;HaNAC38基因'HaNAC38基因;染色体步移;分子鉴定