菜豆黄花叶病毒RPA-LFD技术快速检测方法的建立与应用

来源：江苏农业科学杂志2023年第第14期北京时间：

作者：朱宇翔;秦嘉超;季英华;陈新;陈学好;崔晓艳

单位：1.江苏省农业科学院经济作物研究所，江苏南京 210014； 2.扬州大学园艺与植物保护学院，江苏扬州 225009； 3. 江苏省农业科学院植物保护研究所，江苏南京 210014

摘要：根据菜豆黄花叶病毒(bean yellow mosaic virus，简称BYMV)外壳蛋白基因序列的保守区设计特异性引物和探针，建立蚕豆中BYMV的重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification，简称RPA)检测方法。同时，将该方法与侧向流动试纸条(LFD)检测方法相结合，建立RPA-LFD快速检测方法，并进行特异性和灵敏度验证。结果表明，该方法可在 37~42 ℃等温条件下进行，30 min即可完成检测。灵敏度试验表明，采用 RPA-LFD方法检测BYMV的灵敏性是PCR方法的 100 倍。在特异性试验方面，与同属于马铃薯Y病毒属亲缘关系较近的大豆花叶病毒(soybean mosaic virus，简称SMV)、菜豆普通花叶病毒(bean common mosaic virus，简称BCMV)和芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus，简称TuMV)无交叉反应。因此，本研究建立的菜豆黄花叶病毒RPA-LFD技术检测快速、灵敏且高效，有望成为我国菜豆黄花叶病毒田间诊断与防控的实用性技术手段。

关键词：菜豆黄花叶病毒;重组酶聚合酶扩增;侧向流动试纸条;病毒检测