猪链球菌荚膜多糖抗血清的制备及在血清分型中的应用

来源：江苏农业科学杂志2023年第第13期北京时间：

作者：胡群;肖琦;温立斌;彭大新;何孔旺

单位：1.扬州大学兽医学院，江苏扬州 225009； 2.江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室，江苏南京 210014

摘要：为获得猪链球菌荚膜多糖及其抗血清，采用高压破碎法、乙醇分级沉淀法、酶解法以及Sevage法提取纯化了猪链球菌2、3、7、9型荚膜多糖，采用己二酸二酰肼(ADH)间桥法将荚膜多糖与牛血清蛋白(BSA)偶联，将其制备成油乳疫苗免疫BALB/c纯系雌性小鼠制备抗血清，同时制备了猪链球菌2、3、7、9型全菌灭活苗抗血清进行了间接ELISA试验及玻片试验检测。试验结果显示，制备了高纯度的荚膜多糖，对荚膜多糖-牛血清白蛋白偶联物分析，荚膜多糖偶联蛋白后的分子量变大，荚膜多糖与牛血清白蛋白偶联比为1 ∶1，免疫小鼠表现出较高的免疫原性。而将单独的4种荚膜多糖以及荚膜多糖与牛血清白蛋白(牛血清白蛋白)混合作为比较也免疫小鼠不能激活免疫系统产生IgG抗体，不具有免疫原性。荚膜多糖结合蛋白抗血清与全菌灭活苗抗血清同时进行交叉ELISA以及玻片凝集试验，结果表明这4型荚膜多糖结合蛋白抗血清不与其他型菌株发生反应，具有型特异性，而全菌灭活苗抗血清与其他型菌株会发生一定程度的交叉反应。此研究结果为猪链球菌亚单位疫苗的研制以及猪链球菌分型试剂的制备提供了试验依据。

关键词：猪链球菌;荚膜多糖;抗血清;间接ELISA;玻片凝集试验