致病疫霉酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定

来源：江苏农业科学杂志2023年第第13期北京时间：

作者：陈泓妃;顾赛汝;王洪洋;李灿辉;刘晶

单位：云南师范大学云南省马铃薯生物学重点实验室/云南师范大学云南省高校马铃薯生物学重点实验室，云南昆明 650500

摘要：致病疫霉是引起马铃薯晚疫病的重要病原菌，在全世界范围内造成了严重的经济损失。以2种不同致病力的致病疫霉菌株侵染马铃薯叶片5个时间点的混合菌丝样品作为cDNA文库的材料来源，利用Gateway法分别构建了初级文库与次级文库，初级文库与次级文库的库容量分别为1.60×107、1.52×107 CFU，插入片段长度大多在 1 000~2 000 bp之间，重组率均达到100%。次级文库质粒转化酵母菌构建酵母文库，所得酵母文库滴度为1.00×108 CFU/mL，转化效率为6×108 CFU/μg。结果表明，本研究构建的酵母双杂交cDNA文库质量较高，完全可以满足互作蛋白高质量、高效率筛选的要求。该文库为后续深入解析致病疫霉的致病机制奠定了基础。

关键词：致病疫霉;马铃薯;酵母双杂交;cDNA文库