半夏PtNAC48基因克隆与表达分析

来源：江苏农业科学杂志2025年第第4期北京时间：

作者：苏传栋;纪明芳;王振;朱艳芳;薛涛;伯晨;薛建平

单位：1.淮北师范大学生命科学学院，安徽淮北 235000； 2.淮北师范大学安徽省特色资源植物利用工程实验室，安徽淮北 235000

摘要：根据半夏三代转录组数据，利用PCR技术克隆PtNAC48基因，并对其进行生物信息学分析；利用qRT-PCR技术检测该基因在半夏根、块茎、叶柄、叶片4个组织部位和15% PEG 4000模拟干旱胁迫处理下不同时间段的基因表达变化，以探究干旱胁迫下PtNAC48的功能与作用，为后续研究该基因响应半夏干旱胁迫的分子机制奠定基础。结果表明，成功克隆PtNAC48基因，基因编码区全长1 086 bp，编码361个氨基酸，含有NAC转录因子典型NAM保守结构域；亚细胞定位预测其定位在细胞核中，PtNAC48是亲水性蛋白，无信号肽与跨膜结构，存在糖基化和磷酸化位点。序列比对和进化分析表明，PtNAC48和其他物种已报道的NAC蛋白有相似的保守序列，与玉米ZmNAC071亲缘关系最近。qRT-PCR技术检测结果显示，PtNAC48基因在半夏的叶柄中表达量最高，在根中最低，模拟干旱处理下该基因表达量随处理时间逐渐升高，胁迫24 h时表达量最高，随后呈下降趋势；转录激活试验证明PtNAC48蛋白不具有转录自激活活性。PtNAC48基因受干旱胁迫诱导表达，推测该基因在响应半夏干旱胁迫中发挥着重要作用。

关键词：半夏;NAC转录因子;基因克隆;生物信息学;干旱胁迫;表达分析;转录激活