普通烟草NtARF2基因克隆及表达模式分析

来源：江苏农业科学杂志2025年第第4期北京时间：

作者：武博寒;李鹏志;蒋红娟;刘涛;贺帅;孟岩;喻奇伟;湛佳伟;温海洋;贾宏昉

单位：1.河南农业大学烟草学院，河南郑州 450002； 2.贵州省烟草公司毕节市公司，贵州毕节 551700； 3.史丹利化肥宁陵有限公司，河南商丘 476000

摘要：为探究生长素响应因子NtARF2基因在调控烟草钾的吸收和利用过程中的功能，将烟草K326 NtARF2的cDNA作为模板通过PCR反应进行克隆，利用生物信息学软件分析其结构和功能，通过亚细胞定位技术判断其表达位置，运用qRT-PCR等技术对NtARF2基因的表达模式进行研究。结果表明，NtARF2基因全长2 556 bp，可编码851个氨基酸；NtARF2蛋白相对分子质量为94.528 05 ku；理论等电点为6.37，酸性；不稳定指数为55.11，属于不稳定蛋白，并且不包含跨膜结构域；同源性和进化树分析表明，烟草NtARF2与拟南芥AtARF2同源性和亲缘性较高。亚细胞定位结果表明该蛋白是一个核蛋白；启动子分析和不同胁迫(低钾、高温、干旱、低温、高盐)处理下的qRT-PCR结果显示，NtARF2基因能够响应低钾、高温、干旱和盐胁迫反应，尤其是低钾响应；进一步研究发现该基因具有组织表达特异性，且低钾条件下烟株根、茎和叶片部位该基因表达量显著降低，推测其参与了不同胁迫下钾离子的吸收和再利用，且可能是一个负调控因子。

关键词：普通烟草;NtARF2基因'NtARF2基因;基因克隆;表达模式;低钾胁迫