曲茎石斛转录因子WRKY48的基因克隆及表达分析

来源：江苏农业科学杂志2026年第第10期北京时间：

作者：陈娇;冉令;宋田田;宗自卫;时冉冉

单位：漯河医学高等专科学校，河南漯河 462000

摘要：为了挖掘曲径石斛的抗寒机制，扩大曲径石斛在北方栽培范围，提高其药用价值，以曲茎石斛为材料，在低温(4 ℃)胁迫3、6、9、12、24、48 h后分别采集根、茎、叶不同组织部位，根据兰科相关物种WRKY基因序列设计特异性引物，以cDNA为模板进行PCR扩增，对测序结果进行比对分析，并对WRKY48基因进行系列生物信息学分析，同时采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测WRKY48基因在不同组织不同时间低温胁迫下的表达水平。研究结果表明，获得的曲茎石斛WRKY48基因片段长度为969 bp，该基因编码322个氨基酸，蛋白分子量为34.99 ku；理论等电点(pI)为5.39，为亲水性蛋白，定位于细胞核，含有特征性的WRKY保守结构域。实时荧光定量分析结果表明，WRKY48基因在曲茎石斛根、茎、叶中均有表达，其中在茎中的表达量最高，在叶中表达量最低；茎、叶中WRKY48基因的相对表达量在低温胁迫处理24 h达到最高，明显高于处理组0 h；根中WRKY48基因的相对表达量在低温胁迫处理6 h达到最高，且明显高于处理0 h。推测在曲茎石斛应答低温胁迫中WRKY48基因可能起到关键的调控作用，该结果可为下一步研究曲茎石斛的抗寒机制和选育抗寒性品种提供基础理论参考。

关键词：曲茎石斛;WRKY转录因子;低温胁迫;基因克隆;表达分析