兔出血症病毒2型衣壳蛋白VP60的表达与纯化

来源：江苏农业科学杂志2026年第第5期北京时间：

作者：陈晓雨1;2;3;胡波2;3;仇汝龙2;3;魏后军2;3;陈萌萌2;3;董文宇1;2;3;宋艳华2;3;范志宇2;3;葛雷2;3;李一鸣2;3;徐淮2;3;徐为中2;3;董海龙1;王芳1;2;3

单位：1.西藏农牧大学，西藏林芝 860000； 2.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程重点实验室，江苏南京 210014； 3.兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心，江苏泰州 225300

摘要：为获得高纯度的可自聚为病毒样颗粒(VLPs)的兔出血症病毒2型(RHDV2)衣壳蛋白VP60，首先将可表达RHDV2 VP60蛋白的重组杆状病毒rBAC-RHDV2-VP60接种High Five昆虫细胞，确定最佳表达时间后收取培养液，通过“反复冻融-离心过滤预处理-强阴离子交换柱层析”的纯化工艺，采用10%~30%梯度的1 mol/L NaCl的PB溶液进行洗脱，以获得纯化的VP60蛋白。结果显示，重组杆状病毒接种昆虫细胞后5 d，VP60蛋白表达量最高。表达产物经反复冻融、离心过滤和离子层析，以含30% 1 mol/L NaCl的PB溶液洗脱后获得纯化的VP60蛋白。经SDS-PAGE和Western Blot鉴定，纯化后的VP60蛋白呈现单一条带，大小约为60 ku，表明VP60蛋白纯化后仍具有良好的反应原性。血凝试验显示，纯化后的蛋白浓度相较原始表达的蛋白提高了3倍，蛋白浓度为0.14 mg/mL。本研究通过一系列纯化工艺，成功获得高纯度的RHDV2 VP60蛋白，为基于兔出血症病毒VP60蛋白的VLPs纯化提供了重要的技术支撑，也为后期高品质特异性抗体、检测试剂盒及亚单位疫苗的制备提供了参考。

关键词：兔出血症病毒;VP60蛋白;病毒样颗粒;蛋白纯化