《江苏农业科学杂志》发表论文赏析

生防寡雄腐霉菌GAQ1在不同培养条件下酶活性测定和蛋白组学分析

来源:江苏农业科学杂志2026年第第5期北京时间:

作者:逯佳琪;陈金豪;张金凤;刘芳;魏利辉

单位:1.扬州大学植物保护学院,江苏扬州 225009; 2.江苏省农业科学院植物保护研究所,江苏南京 210014;3.河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳 471023

摘要:为探究生防菌寡雄腐霉GAQ1在碳源依赖条件下的酶活性调控机制并优化其生防应用,以5种类型碳源(葡萄糖、胰蛋白胨、V8、无碳源及SWQ7菌丝粉)培养寡雄腐霉GAQ1,对比了病原菌群结腐霉SWQ7菌丝体粉末与其他碳源对GAQ1分泌蛋白酶的诱导效应,动态监测其上清液中丝氨酸蛋白酶(BApNA底物法)、酪蛋白酶(脱脂牛奶平板法)及β-葡萄糖苷酶(pNP-β-GLC底物法)的活性,并选取酶活性峰值期(培养2 d)的SWQ7菌丝粉组与葡萄糖组上清液,通过SDS-PAGE电泳、主成分分析及蛋白组学分析,筛选出差异丰度蛋白。结果表明,SWQ7菌丝粉组在培养后2 d酶活达峰值,丝氨酸蛋白酶活性[(1.22±0.07) nmol/(μL·h)]、酪蛋白酶活性[以降解脱酯牛奶面积计,(55.4±1) mm2]和β-葡萄糖苷酶活性[(1.86±005) nmol/(μL·h)]显著高于对照组(P<0.05)。蛋白质组学分析显示,SWQ7菌丝粉培养条件下多种差异蛋白丰度显著上调,其中枯草杆菌蛋白酶Po_g1760.t1丰度提升16.9倍(P<0.01),胰蛋白酶Po_g10549.t1提升5.57倍(P<0.01),这可能是导致上清液酶活性显著增强的关键原因。说明群结腐霉SWQ7菌丝体通过特异性诱导枯草杆菌蛋白酶、胰蛋白酶等关键效应蛋白的表达,显著提升了寡雄腐霉GAQ1的酶分泌能力。

关键词:群结腐霉;寡雄腐霉;蛋白酶;主成分分析;蛋白组学分析;生防菌优化

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