数字PCR方法准确测量质粒DNA拷贝浓度

来源：计量学报杂志2017年第2期北京时间：

作者：董莲华,隋志伟,王晶,傅博强

单位：中国计量科学研究院, 北京 100029

摘要：中国计量科学研究院（NIM）利用数字PCR技术针对国际比对样品质粒DNA,通过设计2对特异性的引物和探针、优化PCR扩增体系、排除PCR mastermix中的DNA污染,成功建立了定量该质粒DNA的数字PCR方法。比较了采用单重PCR和双重PCR方法定量结果之间的差异,最终实现了对比对样品的定量和不确定度评定。对线性质粒样品的测量结果及其扩展不确定度（k=2）为(8.06±0.55)×103 copies/mg,该结果在比对参考值不确定度范围内,且与参考值非常接近。

关键词：计量学; 质粒DNA; 数字PCR; 拷贝浓度; 国际比对; 可比性

基金资助：中国计量科学研究院基本业务费（AKY1323,AKY1408）;公益行业专项（AHY1504）