噬菌体展示禽流感病毒抗原变异性基因片段文库的构建

来源：吉林大学学报·理学版杂志2019年第04期北京时间：

作者：田栢会, 易乐, 王习文, 李颂, 付世杰, 王雨田, 曲晗, 李志萍, 王丽萍, 张淑华, 夏志平

单位：1. 长春理工大学 生命科学技术学院, 长春 130022；2. 中国人民解放军军事医学科学院 军事兽医研究所, 长春 130122； 3. 吉林大学 生命科学学院, 长春 130012

摘要：构建T7噬菌体展示禽流感病毒抗原变异性基因片段文库. 首先， 从Gene Bank中查找筛选禽流感病毒抗原变异性基因, 将其截短、 修饰、 简并后得到禽流感病毒抗原变异性基因微阵列. 其次， 将合成的禽流感病毒抗原变异性基因片段文库扩增、酶切, 链接到双酶切后的T7噬菌体载体基因上, 构成重组噬菌体DNA. 最后， 重组噬菌体DNA经体外包装和扩增, 得到T7噬菌体展示文库, 并进行T7噬菌体展示文库滴度、 重组率和免疫活性测定. 实验结果表明, 从Gene Bank中查找、 筛选、 剪切和修饰共获得96 258条序列构建T7噬菌体展示文库, 原始文库滴度为3.6×107个菌落/mL, 重组率大于90%. 用禽流感病毒H5N1抗体进行捕获, 经聚合酶链式反应(PCR)鉴定, 得到理想目的条带, 证明噬菌体表面展示蛋白具有抗原活性, 可用于禽流感病毒感染患者的快速检测及抗原表位筛选.

关键词：T7噬菌体,噬菌体展示,禽流感病毒,抗原变异性基因,文库鉴定