基于小热休克蛋白-细胞穿膜肽蛋白纳米粒的siRNA递送系统

来源：吉林大学学报·理学版杂志2021年第1期北京时间：

作者：王浩, 刘宁, 陈丽, 崔梅英, 王冬梅, 刘宇轩, 关新刚

单位：北华大学 医学技术学院， 肿瘤靶向治疗重点实验室， 吉林 吉林 132013

摘要：利用大肠杆菌表达系统原核表达并纯化小热休克蛋白-细胞穿膜肽融合蛋白（Hsp-Tat）; 用动态光散射和透射电镜成像分析Hsp-Tat纳米粒的粒径和形貌; 用噻唑蓝（MTT）法和活/死细胞染色法研究蛋白纳米粒的细胞相容性； 用凝胶阻滞实验检测纳米粒的小干扰RNA（siRNA）复合特性； 用激光共聚焦荧光显微镜成像研究蛋白纳米粒的siRNA胞内递送能力. 实验结果表明： 亲和层析得到高纯度的Hsp-Tat融合蛋白， 融合蛋白可自组装成40.2 nm空心球形结构； 蛋白纳米粒在HEK-293T细胞上显示出良好的细胞相容性; Hsp-Tat NP与siRNA形成的复合物可阻止siRNA在琼脂糖凝胶中迁移； Hsp-Tat 纳米粒能将Cy3-siRNA转运至细胞内， 可作为一种安全高效的非病毒核酸递送载体.

关键词：热休克蛋白,细胞穿膜肽,蛋白纳米粒,siRNA递送,细胞转染