奶牛小肠上皮细胞热应激模型的建立

来源：家畜生态学报杂志2022年第12期北京时间：

作者：金钊,张艳芳,周华,纪雯雯,魏筱诗,王翀,茅慧玲

单位：浙江农林大学 动物科技学院·动物医学院，浙江 杭州311300

摘要：该试验旨在构建奶牛小肠上皮热应激模型，为研究热应激状态下的肠道养分吸收机制提供平台。43 ℃处理奶牛小肠细胞0、2、4、8、12 h，其中0 h即为37 ℃对照组，CCK8测定细胞存活率，DCFHDA荧光探针法测定细胞活性氧（ROS）含量。结果发现，随着处理时间的增长细胞存活率显著下降（P<0.05），其中处理4 h时存活率为62.6%，且4 h的ROS含量较对照组显著上升（P<0.05），因此选择4 h为后续试验的处理时间。比色法测定总超氧化物歧化酶（TSOD）、铜锌超氧化物歧化酶（CuZnSOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）活性以及培养液中丙二醛（MDA）含量。结果显示：与对照组（37 ℃）相比，43 ℃处理细胞4 h，细胞内TSOD、CuZnSOD和GSHPx 活性均显著降低（P<0.05），培养液中MDA含量显著上升（P<0.05）。综上所述，43 ℃作用奶牛小肠上皮细胞4 h，可构建奶牛小肠上皮细胞热应激模型。

关键词：热应激；奶牛；肠上皮细胞；抗氧化酶

基金资助：国家级大学生创新创业训练计划项目(202010341039)；浙江农林大学学生科研训练项目（1182013200170）