Let-7b-5p靶向MSI2和FOXC1调控绒山羊毛囊干细胞的增殖和分化

来源：家畜生态学报杂志2025年第10期北京时间：

作者：闫海龙,李艳,金妙函,高晔,李进霞,孙文慧,康佳琪,王小龙,陈玉林

单位：1. 山西大同大学 医学院，山西 大同 037009；2. 西北农林科技大学 动物科技学院，陕西杨凌 712100

摘要：该研究旨在揭示miRNA let-7b-5p在绒山羊毛囊干细胞（hair follicle stem cells，HFSCs）增殖和分化过程的调控机制。对绒山羊的毛囊干细胞进行鉴定、分离和培养，通过LipofectamineR3000将let-7b-5p和对照组miRNA（NC mimics）转染至绒山羊毛囊干细胞，利用CCK8和EdU法检测方法评估let-7b-5p对细胞增殖能力的影响，并分析与细胞增殖相关的基因（PCNA、KI67、AKT和mTOR）的表达水平。此外，检测与细胞分化相关的基因（S100A3、K6、Notch1和β-catenin）的表达变化；为了进一步验证let-7b-5p与其预测靶基因之间的相互作用，构建双萤光素酶报告系统，检测let-7b-5p和预测靶基因之间的靶向关系。结果表明，let-7b-5p对HFSCs的增殖能力有显著的抑制作用（P<0.01），let-7b-5p处理的HFSCs中细胞增殖关键标志基因PCNA、KI67以及AKT信号通路相关基因的表达显著下降（P<0.01）。let-7b-5p显著激活了毛囊分化相关标志基因K6和S100A3以及Notch1通路的表达（P<0.01）。let-7b-5p过表达时，MSI2和FOXC1基因的萤光素酶报告活性有显著下降。综上所述，let-7b-5p直接靶向FOXC1和MSI2基因，经AKT信号通路抑制绒山羊HFSCs的增殖；同时，let-7b-5p通过Notch信号通路促进了绒山羊HFSCs向毛囊细胞的定向分化。

关键词：绒山羊；毛囊干细胞；增殖；let-7b-5p

基金资助：山西省科技厅自然科学研究面上项目（202203021221208）；国家自然科学基金（32072719、31972526）；山西省卫健委科技兴医创新项目（2023XM033）；大同市科技局项目（2024048）