精子密度、R848浓度和孵育时间对奶山羊精子分选效果的互作影响

来源：家畜生态学报杂志2026年第3期北京时间：

作者：胡张涛,廖云琼,别志文,郭松茂,贤明,李子晨,欧阳李迪,周旭东,李宇,胡建宏,陈玉林

单位：1. 西北农林科技大学 动物科技学院，陕西 杨凌 712100，2. 徐州生物工程职业技术学院，江苏 徐州 221006，3. 陕西农林职业技术大学，陕西 杨凌 712100

摘要：免疫学分离法是实现性别控制的新方法，通过直接激活差异蛋白而实现X、Y精子分离，但分选体系依然不完善，分离效果不稳定。本研究采集10只奶山羊新鲜精液，分析其精子密度（3×108、6×108、9×108 cells/mL）、激活剂R848浓度（0、0.2、0.6、1.0、1.4、1.8 μmol/L）及孵育时间（30、45、60 min）的互作对奶山羊X、Y精子分离的影响，利用流式细胞仪检测分选后的精子比例。结果显示，与常规稀释精液组（X精子占比51.4%）相比，取下层精液时，X精子比例极显著升高（P<0.01）。其中，精子密度为3×108、6×108、9×108 cells/mL时，分别添加1.4 μmol/L R848分两次孵育60 min、30 min和45 min，X精子占比分别为87.9%、88.1%和84.4%，较对照组分别提高了36.5%、36.7%和33.0%。同时，与常规稀释精液组（Y精子占比51.0%）相比，取上层精液时，Y精子比例亦极显著升高（P<0.01）。当精子密度为6×108 cells/mL时，添加1.4 μmol/L R848孵育30 min或添加0.6 μmol/L R848孵育45 min；以及精子密度为9×108 cells/mL时，添加0.6 μmol/L R848孵育60 min，Y精子占比分别为83.7%、85.7%和84.4%，较对照组分别提高了32.7%、34.7%和33.4%。在适宜的互作条件下，奶山羊精子TLR7/8激活分选体系可获得高纯度性控精液，其准确率可达85%，从而初步建立山羊精子TLR7/8分选体系，以期完善基于免疫学分离法的奶山羊性别控制技术。

关键词：奶山羊精液；Toll样受体7/8（TLR7/8）；雷西莫特（R848）；X、Y精子分选

基金资助：国家重点研发计划项目（2022YFD1300200）；陕西省重点研发计划项目（2024NC-ZDCYL-03-02）；徐州市科技计划项目（KC23135）