猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白在杆状病毒系统中的表达与纯化

来源：家畜生态学报杂志2026年第8期北京时间：

作者：张园

单位：西安职业技术学院，陕西 西安 710017

摘要：试验旨在制备高活性的猪戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus, HEV）ORF2蛋白，优化病毒样颗粒疫苗的制备策略，为低成本、高产量猪HEV新型疫苗研发提供新思路。以含有猪HEV毒株ORF2基因序列的载体为模板，利用RT-PCR扩增、酶切和连接的方法构建含有编码猪HEV ORF2蛋白基因的重组杆粒rBac-SDS-HEV-p495，将其转染至SF9细胞获得重组杆状病毒。将重组杆状病毒感染SF9细胞后，经Western blot和IFA验证目的蛋白是否表达；利用蔗糖密度梯度离心和离子交换层析方法对获得目的蛋白进行纯化。结果表明，成功构建重组杆状病毒rBac-SDS-HEV-p495。病毒感染SF9细胞后，在细胞和上清中成功表达大小为55 kDa的猪HEV ORF2蛋白，上清中的目的蛋白表达量达到20 mg/L。研究结果成功通过杆状病毒系统表达具有较高活性的猪HEV ORF2蛋白，为猪HEV 新型疫苗研发及诊断试剂的研发奠定重要基础。

关键词：猪戊型肝炎病毒；重组杆状病毒；SF9细胞；蛋白纯化

基金资助：陕西省教育厅专项科研计划项目（24JK0669）；西安职业技术学院博士科研启动项目（2025QDJF04）;创新能力支撑计划-陕西省青年科技新星项目（2026RC-KJXX-082）