一例HIV-1广谱中和者体内病毒膜蛋白基因进化特征及中和敏感性研究

来源：疾病监测杂志2023年第4期北京时间：

作者：苑珍珍,李康,胡彩琴,郝彦玲,冯毅,王铮

摘要：目的 分析一例HIV-1广谱中和者体内病毒膜蛋白基因（env）进化特征及其中和敏感性。方法 从感染者两个随访时间点的全血样本中提取前病毒DNA，使用单拷贝基因组扩增（SGA）方法扩增全长env基因，测序后进行序列比对和进化树构建，分析env基因可变区特征及CD4结合位点（CD4bs）的氨基酸特征。 将有代表性的env基因克隆到pcDNATM3.1载体上，与骨架质粒pSG3△env共转染293T细胞制备假病毒，检验其感染能力，筛选出功能性膜蛋白，再将有功能性的假病毒与不同的广谱中和抗体进行中和试验，分析膜蛋白的中和特征。结果 从两个时间点全血样本中共获得 43 条全长env基因，进化树分析显示两个时间点的env序列交叉聚集，膜蛋白序列的基因距离随时间推移而增加。 对病毒膜蛋白基因可变区的分析显示，V5区的糖基化位点数目随时间的推移而减少，后一时间点有16%的序列在V1区进化出两个额外的半胱氨酸；中和实验显示V1区半胱氨酸插入不会影响病毒针对V3环中和抗体的敏感性，V5区N460糖基化位点缺失导致假病毒对CD4bs类抗体的敏感性略有下降。结论 病毒膜蛋白基因在体液免疫的压力下持续进化；关键中和表位中氨基酸变异导致病毒发生中和逃逸。

关键词：艾滋病病毒, 膜蛋白基因, 假病毒, 糖基化位点, 免疫逃逸