实时荧光定量PCR方法检测青藏高原喜马拉雅旱獭血样中布鲁氏菌DNA

来源：疾病监测杂志2022年第3期北京时间：

作者：李积权,马丽,薛红梅,徐立青,张爱萍,于守鸿,任玲玲,杨旭欣

摘要：目的 应用实时荧光定量PCR（real-time PCR）方法检测青藏高原喜马拉雅旱獭血样中布鲁氏菌DNA。方法 2019—2020年收集青海省青藏高原喜马拉雅旱獭全血，进行布鲁氏菌病血清学试验，包括虎红平板凝集试验（RBT）、试管凝集试验（SAT）微量法、胶体金免疫试验（GICA），阳性标本进行real-time PCR检测。 分析real-time PCR方法的灵敏度、特异度等指标，评价其结果的准确性。结果 共收集全血1 466份，RBT检出阳性64 份，GICA检出阳性28份，SAT检出阳性18份。64 份RBT阳性标本进行real-time PCR检测，其中56份标本及阳性对照菌株有特异的荧光扩增曲线，8份标本及阴性对照无特异的扩增曲线。 real-time PCR与SAT、GICA比较灵敏度为100%，与RBT比较特异度为99.93%，Kappa值为0.81，高度一致。结论 与传统方法相比，real-time PCR方法具有快速、特异等优点，可以用于青藏高原喜马拉雅旱獭样本检测。

关键词：布鲁氏菌, 青藏高原喜马拉雅旱獭, 实时荧光定量PCR