基于CRISPR/Cas蛋白的副溶血弧菌检测方法的研究

来源：疾病监测杂志2020年第6期北京时间：

作者：王群,李哲,赵林,王紫鉴,赵宏群,阚飙,逄波

摘要：目的利用规律间隔性成簇短回文重复序列（CRISPR）免疫原理及Cas12a酶的特点构建一种快速检测副溶血弧菌（VP）的方法，实现对病原菌准确快速的检测和识别。方法本研究通过制备纯化Cas12a蛋白，筛选构建VP的gRNA，建立CRISPR-VP荧光检测系统，根据最终荧光扩增曲线判定CRISPR-VP检测方法的有效性。结果在CRISPR-VP检测方法中只在VP的序列存在时才会产生明显的荧光信号。结论本实验初步建立了基于CRISPR/Cas蛋白的VP的检测方法，为后续简易检测试剂的研制提供理论依据。

关键词：规律间隔性成簇短回文重复序列, Cas12a, 副溶血弧菌, 分子检测