检测气单胞菌属的SYBR Green荧光PCR方法的建立和评价

来源：疾病监测杂志2020年第5期北京时间：

作者：杜小莉,刘九银,洪颖,王利,江良梁,陈谨,卢昕,阚飙,周海健,崔志刚

摘要：目的建立一种检测气单胞菌的SYBR Green荧光PCR方法。方法使用文献报道的气单胞菌属16S rRNA基因扩增引物，建立SYBR Green荧光PCR检测方法，评价其特异性、灵敏度和实际应用价值。结果SYBR Green荧光PCR方法的检测下限为10–7 ng/ml，检测的21株气单胞菌均为阳性，检测的弧菌、大肠埃希菌、沙门菌、小肠结肠炎耶尔森菌、志贺菌均为阴性。 针对104份健康人群粪便样本，8.65%的样本分离到气单胞菌，28.85%的样本SYBR Green荧光PCR方法检测阳性。 其中8份标本采用2种方法检测均为阳性。 样本核酸检测阳性后再进行病原菌的分离，会漏检1份样本（11.11%），但可以减少71.15%（74/104）的分离培养及鉴定工作。结论SYBR Green荧光PCR方法具有很好的特异性和敏感度，用于大样本的早期筛查可以减少70%左右的工作量，适合应用于气单胞菌感染和携带的监测。

关键词：气单胞菌, 荧光PCR, 分子检测