侧流层析–重组酶聚合酶扩增技术快速检测土拉弗朗西斯菌

来源：疾病监测杂志2019年第5期北京时间：

作者：彭遥,阚飙,夏连续,李伟,张雯,卢金星,秦爱平

摘要：目的利用侧流层析–重组酶聚合酶扩增（LF-RPA）技术建立快速、敏感、特异的土拉弗朗西斯菌（土拉菌）检测方法。方法基于土拉菌特异性基因（tul4）设计重组聚合酶恒温扩增方法的引物及探针，优化反应时间和温度，同时评价该方法的灵敏度及特异性，并通过模拟血液样品评估此方法的实用性。结果该方法最佳反应条件是40 ℃，20 min，可检测核酸浓度最低为20 fg/μl，与实时荧光定量PCR（qPCR）方法相近，且不与7种非土拉菌发生交叉反应。 土拉菌模拟样本最低检测浓度为460 CFU/ml。结论该检测方法操作简单，特异性良好，敏感度高且无需大型精密实验设备，在临床及现场检测土拉菌中具有应用前景。

关键词：土拉弗朗西斯菌, 重组酶, 重组酶聚合酶扩增, 侧流层析