食品检验用标准菌株分子水平质控方法的建立与应用

来源：疾病监测杂志2018年第9期北京时间：

作者：徐潇,石继春,王春娥,梁丽,李康,孙文媛,陈翠萍,叶强

摘要：目的建立食品检验用标准菌株分子水平质控方法，并进行应用。 方法使用16S rRNA基因序列分析、脉冲场凝胶电泳（PFGE）、多位点序列分型等分子生物学技术手段，对食品安全国家标准中使用的标准菌株进行分子确认，并对不同的批号进行验证。 结果16S rRNA基因序列比对结果符合该菌株所在的菌属，并获得标准菌株16S rRNA基因标准序列，不同批号的标准菌株16S rRNA基因序列完全一致；确定了每株标准菌株的ST型和基因型，并对不同批号的菌株进行了基因型比较，未发现型别改变；对无PulseNet标准操作方法的菌株，开展方法学研究，获得了最适用的限制性内切酶和电泳参数，建立了标准菌株分子指纹图谱，比较不同批号菌株的PFGE图谱，相似性均为100%。 结论本研究首次将分子生物学技术应用到标准菌株的质量控制，突破了使用传统质控方法的瓶颈，从分子水平实现对标准菌株稳定性的评价，保证了标准菌株在食品检验过程中的稳定性和一致性。

关键词：标准菌株, 分子水平质控方法, 脉冲场凝胶电泳, 多位点序列分型, 食品检验