脓毒症常见病原菌多重实时PCR检测方法的建立

来源：疾病监测杂志2017年第9期北京时间：

作者：郑皓,李文革,杨海英,吴媛,车洁,陈小萍,卢金星

摘要：目的 建立可同时检测脓毒症患者血液中肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和白假丝酵母菌的多重实时PCR方法。方法 根据各病原菌基因组保守序列设计引物和探针，建立多重实时PCR检测方法。对建立的多重实时PCR检测方法进行特异性、敏感性和灵敏度分析，并使用该法对112份脓毒症血培养阳性标本进行验证。结果 成功建立脓毒症常见病原菌的多重实时PCR检测方法。此方法特异性、敏感性良好，灵敏度达10-5 ng/l，与标准检测方法（血培养加生化鉴定）相比，缩短了20 h。112份临床血培养阳性标本中，目标病原菌83例，多重实时PCR检出80例阳性；非目标病原菌29例，多重实时PCR检测均为阴性。检测结果显示，该方法特异性达100%，敏感性达96.39%。结论 该多重实时PCR检测方法具有快速、高效、灵敏、特异的优点，可用于临床重症监护室患者血液常见感染病原菌的诊断。

关键词：脓毒症, 肺炎克雷伯菌, 大肠埃希菌, 铜绿假单胞菌, 鲍曼不动杆菌, 凝固酶阴性葡萄球菌, 金黄色葡萄球菌, 白假丝酵母菌, 多重实时PCR