一种快速核酸提取试剂在流感病毒检测中的应用评价

来源：疾病监测杂志2016年第11期北京时间：

作者：石伟先,张靖,孙瑛,刘医萌,潘阳,赵佳琛,张代涛,崔淑娟,彭晓旻,卢桂兰,陈丽娟,王全意,杨鹏

摘要：目的 探讨一种快速核酸提取试剂在流感病毒检测中的适用性及有效性。方法 选取流感病毒H3亚型、乙型Yamagata系细胞株和甲型H1N1型鸡胚株各1株，对其倍比稀释液及2015年北京市流感病原学监测阳性的67份咽拭子样本，同时采用快速提取法及离心柱提取法提取病毒核酸，经实时荧光PCR法进行定性、定量检测，检测结果采用SPSS 19.0软件进行统计分析。结果 快速提取法提取细胞培养液、鸡胚培养液中流感病毒核酸的最低检测限高于离心柱法10倍，咽拭子样本则高100倍；快速提取法提取核酸后检测到的病毒载量均低于离心柱法，其中对含有病毒量较高的毒株检测到的病毒载量低于离心柱法10倍，而对病毒量较少的咽拭子样本，则低100倍；快速提取法稳定性优于离心柱法；提取后的核酸-80℃保存10 d后冻融复测，快速提取法核酸损失量大于离心柱法。67份离心柱提取法检测阳性咽拭子样本使用快速提取法提取核酸后检测，两种方法阳性符合率总计为92.54%，其中10～102拷贝/ml组，阳性符合率为76.92%，102～103拷贝/ml组，阳性符合率为92.59%，103拷贝/ml组，阳性符合率为100%。结论 快速提取法具有稳定性高、易于操作、不易污染的优势，适用于细胞培养液、鸡胚培养液等病毒含量较高的大量样本中流感病毒核酸提取，适于检测样本量大、人手不足、设备欠缺的基层实验室使用；但-80℃冻融后核酸损失量较大，不宜反复冻融后使用；传统的离心柱法对于病毒含量较少的咽拭子样本及核酸需被反复冻融使用时具有优势。

关键词：流感病毒核酸, 快速核酸提取试剂, 离心柱法