传代培养对基于肽质量指纹谱的细菌识别稳定性影响分析

来源：疾病监测杂志2016年第9期北京时间：

作者：张慧芳,陶晓霞,何利华,闫笑梅,王忱诚,张建中,肖迪

摘要：目的 应用肽质量指纹谱技术对多次传代细菌进行识别，分析细菌传代对细菌识别能力的影响。方法 将幽门螺杆菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌分别连续传57、50、100代，金黄色葡萄球菌留取抗原。每一代新鲜培养菌和冻存抗原通过乙醇/甲酸法提取蛋白，采用肽质量指纹谱技术进行谱图采集和菌株鉴定。进一步采用NanoLC-MS/MS对幽门螺杆菌基于肽质量指纹谱识别的蛋白进行批量鉴定。结果 幽门螺杆菌、大肠埃希菌分别连续传57代和50代，采用肽质量指纹谱每代均能正确识别到种水平；金黄色葡萄球菌连续传100代，采用肽质量指纹谱每代新鲜菌株及冻存抗原均能正确识别到种水平，各代冻存抗原和新鲜菌株的肽质量指纹谱具有很好的一致性。幽门螺杆菌蛋白扫描分析，鉴定出206个蛋白，包括各种酶类（29.6%）、核糖体蛋白（15.5%）、外膜蛋白（10.7%）、假想蛋白（19.0%）、转运相关蛋白（2.0%）、其他蛋白（22.0%）。结论 细菌连续传代和抗原冻存不影响肽质量指纹谱对菌株的正确识别，细菌的肽质量指纹谱具有传代稳定性。

关键词：肽质量指纹谱, 细菌鉴定, 传代, 稳定性