牛分枝杆菌重组蛋白TB10.4对RAW264.7细胞TLR2表达和分布的影响

来源：华中农业大学学报杂志2015年第1期北京时间：

作者：刘淑清

摘要：为探讨牛分枝杆菌TB10.4蛋白与RAW264.7细胞的相互作用关系，表达纯化了rTB10.4，并采用 IFN-γ释放试验和Western blot检测其细胞活性。使用不同剂量rTB10.4与RAW264.7细胞共孵育后，采用实时无标记动态细胞分析技术检测rTB10.4对RAW264.7细胞生长影响的最佳时间点和最佳剂量。在此基础上，采用量化流式细胞仪分析重组蛋白rTB10.4对RAW264.7细胞TLR2表达的影响。结果表明，获得的rTB10.4具有较强的T细胞和B细胞活性，rTB10.4对RAW264.7细胞的作用呈剂量依赖性,作用起效时间为12~24 h，诱导作用在16~18 h达到最大效应值。量化流式分析仪分析结果表明，rTB10.4刺激可显著增强RAW264.7细胞的细胞膜上TLR2的表达。

关键词：TB10.4重组蛋白; 牛分枝杆菌; RAW264.7细胞; 动态实时细胞分析检测技术; TLR2 

基金资助：国家自然科学基金项目(31302130); “中国农业科学院科技创新工程”兽医公共卫生安全与管理创新团队(ASTIP-IAS-11); 国家“863”高技术研究与发展专项(2012AA101302)