链霉菌GEMSM4(6)中聚酮合酶和非核糖体多肽合成酶基因的筛选及克隆

来源：华中农业大学学报杂志2015年第4期北京时间：

作者：李娜

摘要：链霉菌GEMSM 4(6)的发酵产物具有抗革兰氏阳性菌和阴性菌的活性，同时还对酵母及丝状真菌尤其是植物病原菌，具有较强的抑制作用。本研究利用简并性引物对该链霉菌基因组中可能存在的聚酮合酶（PKS）和非核糖体多肽合成酶（NRPS）基因进行PCR扩增及序列分析，找到了3个NRPS及15个PKS基因的片段,其中PKS基因与Streptomyces violaceusniger Tu 4113的PKS基因序列同源性最高，达到91%~99%;而NRPS基因与数据库中已知的NRPS基因序列同源性仅为60%~62%。为克隆NRPS生物合成基因簇，构建了链霉菌GEMSM 4(6)的基因组细菌人工染色体（BAC）文库，通过PCR筛选得到包含有这3个NRPS基因的克隆子，为后期的异源表达及基因组发掘分析提供基础。

关键词：链霉菌; 聚酮合酶; 非核糖体多肽合成酶; 简并性引物; 细菌人工染色体文库

基金资助：国家自然科学基金项目（31270136）；教育部留学回国人员科研启动基金项目(\[2009\] 1590)；教育部新世纪人才支持计划项目（NCET-08-0779）