梅山猪耳组织成纤维细胞及其处理对核移植重组胚发育的影响

来源：华中农业大学学报杂志2015年第6期北京时间：

作者：华再东

摘要：为研究供体细胞不同处理方法对核移植重构胚发育能力的影响，分别用血清饥饿不同时间和传代次数的供体细胞进行核移植，比较重组胚的卵裂率和囊胚率。结果发现，饥饿0、2、4、8 d的核供体细胞，重组胚在卵裂率上没有表现显著的差异，而饥饿2 d和4 d试验组的囊胚率却显著高于其他组；以传代0、2、4、8代的细胞作为供体细胞进行核移植，未经传代的细胞直接作为核供体卵裂率为57.69%，明显低于经过传代的细胞；细胞的传代次数在重组胚卵裂率上并未表现出明显的不同，但传至第4代细胞构成重组胚的卵裂率和囊胚率最高(86.29%和23.36%)。试验选取饥饿处理2 d、传4代的成纤维细胞作为核移植的供体，挑选发育良好的重组胚移植到6头代孕母猪体内，3头代孕母猪在第1到第3个情期相继返情，1头在胚胎移植45 d流产；2头没有返情，B超检查受孕，其中1头代孕母猪到预产期顺利产下6头健康胎儿。

关键词：供体细胞; 重组胚; 核移植; 猪;血清饥饿; 传代次数

基金资助：国家转基因生物新品种培育重大专项（2014ZX08010-003，2014ZX08006-003）；湖北省农业科技创新中心课题（2011-620-001-003）