利用同框敲除技术研究Ⅲ型聚酮合酶基因orf18的代谢产物

来源：华中农业大学学报杂志2016年第1期北京时间：

作者：原海亮

摘要：为了阐明Streptomyces sahachiroi ATCC 33158中Ⅲ型聚酮合酶基因orf18的功能，利用同源双交换的方法对该基因进行同框敲除，采用异位表达的方法进行了相应的回补实验。通过高效液相色谱及液相色谱-质谱联用分析发现基因orf18的敲除会明显降低发酵产物中苯甲酸盐的含量，回补该基因能够在一定程度上恢复苯甲酸盐的产量，表明orf18在原宿主中极有可能参与苯甲酸盐的生物合成。

关键词：链霉菌; Ⅲ型聚酮合酶; 同源双交换; 同框敲除; 基因回补; 苯甲酸盐

基金资助：国家自然科学基金项目（31270136）；教育部留学回国人员科研启动基金项目(［2009］ 1590)；教育部新世纪人才支持计划项目（NCET-08-0779）