华癸中慢生根瘤菌7653R MCHK_8182基因的共生固氮功能

来源：华中农业大学学报杂志2016年第4期北京时间：

作者：路达

摘要：根据华癸中慢生根瘤菌7653R全局转录组分析结果，获得在共生固氮阶段显著上调表达的基因MCHK_8182；设计重叠延伸PCR引物，构建MCHK_8182双交换突变重组质粒载体；通过三亲本杂交，将突变载体导入7653R；在蔗糖压力培养下进行筛选，最终获得MCHK_8182双交换突变株。PCR及测序验证双交换突变株构建成功。植物盆栽试验结果显示，与7653R野生型接种的植株相比，MCHK_8182突变菌株接种的植株根瘤数减少，但固氮酶活未见明显差异。

关键词：华癸中慢生根瘤菌; 细胞色素P450; 双交换; 突变株; 共生固氮; 共生基因MCHK_8182; 表型

基金资助：国家重点基础研究发展计划(“973”计划) (2010CB126500)； 国家自然科学基金项目(31371549)；高等学校博士点基金专项(20110146110012)