《华中农业大学学报杂志》发表论文赏析

肉色吸水链霉菌SH121接合转移系统的建立

来源:华中农业大学学报杂志2016年第4期北京时间:

作者:杨卓

摘要:利用单因素试验探索了热激处理、预萌发时间、供体宿主菌的类型、供受比及MgCl2浓度对链霉菌SH121接合转移效率的影响,结果显示:在50℃热激10 min,37℃预萌发1 h,以大肠杆菌DCDA/pUZ8002为供体宿主菌,在供受比为100∶1时,使用添加40 mmol/L MgCl2的培养基MISP4,接合转移效率最高可达到每受体1.03×10-3个接合子。利用建立好的接合转移方法,将整合型质粒pSET152和基因敲除质粒pYZ09成功地导入链霉菌SH121,证实该方法可用于后期链霉菌SH121活性天然产物的挖掘及其相关生物合成基因簇的研究工作。

关键词:肉色吸水链霉菌SH121; 接合转移; 遗传操作; 基因敲除

基金资助:国家自然科学基金项目(30970059,31270136);教育部留学回国人员科研启动基金项目(20091590);教育部新世纪人才支持计划项目(NCET080779)

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