鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2) ORF25蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备

来源：华中农业大学学报杂志2017年第2期北京时间：

作者：彭俊杰

摘要：利用PCR方法扩增鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2) ORF25基因的部分基因序列，并将扩增产物连接到原核表达载体Pgex-KG，成功构建了CyHV-2 ORF25-KG重组质粒。IPTG将其诱导后，SDS-PAGE分析表明：目的蛋白得到表达，分子质量大小为42 ku，且主要以包涵体形式存在；用纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠，多次免疫后通过细胞融合，筛选出1株单抗5C6；经间接免疫荧光试验和Western blot试验验证，这株单抗可以识别CyHV-2 ORF25蛋白。

关键词：鲤疱疹病毒Ⅱ型; ORF25蛋白; 原核表达; 单克隆抗体

基金资助：湖北省科技支撑计划项目（2015BBA234）； 中央高校基本科研业务费专项（2013PY071）