CRISPR/Cas9在豆科植物毛根转化中的应用及共生基因的编辑

来源：华中农业大学学报杂志2017年第5期北京时间：

作者：谭茜

摘要：将CRISPR/Cas9系统与毛根转化相结合，在豆科植物百脉根和大豆中对结瘤因子受体激酶基因NFR1进行多靶点敲除,旨在快速、便捷获得目的基因突变体。结果表明：在百脉根和大豆中均获得了目的基因敲除的突变体；其中，百脉根LjNFR1基因中靶位点1处的敲除效率为58.3%，在靶位点2处的敲除效率为0；大豆GmNFR1靶位点1处的敲除效率为33.3%，靶位点2处的敲除效率为41.7%。进一步测序分析发现，CRISPR/Cas9系统可同时敲除大豆基因组上编码NFR1的2个同源基因(GmNFR1和GmNFR1b)，为研究植物体内基因的功能冗余提供了技术支持。同时，CRISPR/Cas9系统在毛根转化中的运用进一步地缩短了获得突变体的周期。

关键词：CRISPR/Cas9; 基因组编辑技术; 定点编辑; 结瘤因子受体激酶1; 豆科植物

基金资助：国家重点研发计划项目（2016YFD0100702）; 国家自然科学基金面上项目（31370278）; 农业微生物学国家重点实验室项目（AMLKF200804）