一种优化的适用于双向电泳的水稻纹枯病菌蛋白质提取方法

来源：华中农业大学学报杂志2017年第5期北京时间：

作者：舒灿伟

摘要：为开展水稻纹枯病菌蛋白质组学的研究，采用TCA-丙酮法、SDS法和TCA-丙酮-酚/SDS联合抽提法对水稻纹枯病菌蛋白质提取质量进行比较，并建立了双向电泳体系。对电泳后的图谱用Quantity One软件进行分析，结果发现：TCA-丙酮法、SDS法和TCA丙酮-酚/SDS联合抽提法所获得的蛋白质双向电泳图谱中，分别记录得到557、309和877个蛋白质点。SDS法提取的蛋白质样品杂质较多，存在盐离子和小分子物质干扰，得到的蛋白点较少；TCA-丙酮法提取的蛋白质样品呈黄色，有色素残留；而在TCA-丙酮法的基础上，增加酚/SDS抽提步骤，能够有效地去除样品中的盐离子和色素等杂质，获得背景清晰、分辨率高的蛋白图谱。结果表明，本研究建立了一种优化的TCA丙酮-酚/SDS联合抽提法，该法适用于水稻纹枯病菌蛋白质双向电泳的提取。

关键词：水稻纹枯病菌; 双向电泳; 蛋白质组学; 丝状真菌; 三氯乙酸

基金资助：国家自然科学基金项目（31470247）； 广东省自然科学基金（博士启动）项目（1614050001896）