环介导等温扩增法（LAMP）检测最短尾短体线虫

来源：华中农业大学学报杂志2018年第06期北京时间：

作者：刘星彤

摘要：为了快速、简便、准确地检测重要植物病原线虫—最短尾短体线虫（ Pratylenchus brachyurus ），依据GenBank中短体线虫的线粒体DNA细胞色素氧化酶I（mtDNA COI）序列，设计了扩增最短尾短体线虫的环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）引物，并对LAMP反应条件进行优化，成功建立了一种可特异、快速检测最短尾短体线虫的LAMP体系。该体系在64℃下反应60 min，扩增效率最高。用琼脂糖凝胶电泳、酶切分析和SYBR Green I染色均能特异检测到最短尾短体线虫的扩增产物。所建立的LAMP体系能从供试的9种短体线虫和另外10种植物线虫中特异检测出最短尾短体线虫，其灵敏度可检测到1/200条线虫DNA，是常规PCR的10倍。表明本研究建立的最短尾短体线虫的LAMP检测体系，可用于最短尾短体线虫的快速检测。

关键词：最短尾短体线虫; 环介导等温扩增; 线粒体DNA细胞色素氧化酶I; 快速检测

基金资助：国家自然科学基金项目（31471750）；广东省林业科技创新专项（2015KJCX045）