百脉根泛素结合酶LjE2的表达及活性鉴定

来源：华中农业大学学报杂志2019年第1期北京时间：

作者：刘超

摘要：为了研究泛素化作用在豆科植物共生固氮过程中的调控功能和作用机制，利用拟南芥泛素结合酶E2的序列，在百脉根基因组上鉴定得到14个编码E2（LjE2）的基因，从LjE2中克隆到11个基因并构建了融合表达载体pETLjE2s:His。通过大肠杆菌表达系统，表达并纯化到10个LjE2:His融合蛋白。经体外泛素化及Western blot分析，在10个LjE2中有9个具有泛素结合酶活性，1个（LjE25）未检测到泛素结合酶活性。

关键词：百脉根; 泛素结合酶; 体外泛素化; 原核表达系统

基金资助：国家自然科学基金项目 (31770265)； 国家科技基础性工作专项（2015FY110700）； 中央高校基本科研业务费专项（2662015PY230）