溜曲霉M3b产壳聚糖酶的固体发酵工艺优化及酶学性质

来源：华中农业大学学报杂志2022年第5期北京时间：

作者：姚炎，李菁菁，张雨萌，赵南鹏，丁德征，苏淑慧，付星

单位：1.华中农业大学食品科学技术学院/国家蛋品加工技术研究中心,武汉 430070;2.湖北省农产品质量安全检测中心,武汉 430070

摘要：为挖掘专一性壳聚糖酶，从多地土壤中筛选出1株高壳聚糖酶活力的真菌M3b，对其进行了形态学观察和18S rDNA序列鉴定，采用单因素试验和正交试验优化固体发酵工艺，研究纯酶的酶学性质。结果显示，菌株M3b为溜曲霉，其最佳产酶发酵条件为：以水为100%计，1%胶体壳聚糖+1%葡萄糖、0.5%硫酸铵、麸皮∶豆粕=6∶10、接种量为10 %、发酵6 d、初始发酵pH 7.0、发酵温度32 ℃。在此条件下酶活力达到20.56 U/mL，是初始发酵条件的221.3%。SDS-PAGE和酶谱分析发现该菌株只产1种壳聚糖酶，分子质量为40 ku。该酶的酶促反应最适pH值为5.5，最适温度为60 ℃，水解产物聚合度≥2。结果表明，采用溜曲霉进行固体发酵可以显著提高壳聚糖酶的酶活力，降低生产成本，纯化后的壳聚糖酶AtChito40酶学性质稳定，耐酸碱，且能有效地降解壳聚糖。

关键词：溜曲霉;壳聚糖酶;壳寡糖;固体发酵;酶活力;纯化

基金资助：国家自然科学基金项目（32072158）；国家级大学生创新创业训练计划（S202110504232）