《化学通报杂志》发表论文赏析
作者:杨少媛,朱嘉,吴彦,王晓锐,吴海静,贾宗超,郑积敏
摘要:大肠杆菌在细胞分裂时,FtsZ (Filamentous temperature-sensitive protein Z) 蛋白会在细胞中部潜在位点聚合形成Z环,而MinC蛋白会抑制Z 环形成,从而控制细胞分裂。本研究将FtsZ与MinC目的基因克隆到合适的载体中,并导入到大肠杆菌中进行表达,采用亲和层析和分子筛纯化的方法得到MinC/FtsZ复合物蛋白进行晶体筛选。通过FtsZ、MinC共转化法和FtsZ、MinC分别单独转化、表达纯化后混合两种方法得到FtsZ/MinC蛋白复合物,并分别对其进行晶体筛选。实验结果表明,在适宜的表达条件下,利用分别转化、纯化再混合的方法得到的FtsZ和MinC蛋白复合比例约为1:1;混合时加入GTP和MgCl2可以促进复合物聚集态更单一,通过晶体筛选初步得到形状为针状的FtsZ/MinC复合蛋白晶体,为MinC/FtsZ复合物的结构解析提供实验基础。
关键词:细胞分裂,复合物,结晶,MinC,FtsZ,
基金资助:国家自然科学基金(批准号21133003, 21273023)和国家“973”计划项目(批准号2012CB910304)资助。