miR-411-3p靶向调节SMURF2抑制肺泡Ⅱ型上皮-间质转化拮抗小鼠矽肺纤维化

来源：环境与职业医学杂志 2025年第12期北京时间：

作者：王思懿, 杜佳琨, 单斯源, 李冰冰, 王欣宇, 魏中秋, 徐洪, 高学敏,

摘要：背景职业性尘肺病居各类职业病之首，其中矽肺病占比50%以上。微小RNA（miRNA）在矽肺纤维化发生进程中发挥着重要作用，但具体作用机制尚未完全明确。目的探讨miR-411-3p调节SMAD特异性E3泛素连接酶2（SMURF2）/Smad7泛素化降解，抑制小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（MLE-12）-间质转化（EMT），拮抗矽肺纤维化的作用机制。方法将24只8周龄SPF级C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组、矽肺（silica）模型组、miR-411-3p激活剂对照组（silica+miR-411-3p agomir-NC）、miR-411-3p激活剂矽肺组（silica+miR-411-3p agomir），每组6只。采用一次性支气管灌注50 μL二氧化硅（SiO2）悬液（200 mg·kg−1）制备矽肺小鼠模型。体外培养MLE-12，分为（1）对照组、SiO2组，（2）SiO2+沉默对照（siRNA-NC）组、SiO2+Smurf2基因沉默（si-Smurf2）组，（3）SiO2+溶剂（DMSO）对照组、SiO2+蛋白酶体抑制剂（MG132）组，（4）突变序列（Mut）+miR-411-3p模拟物对照（miR-NC）组、Mut+miR-411-3p模拟物（mimic）组、野生序列（Wt）+miR-NC组、Wt+miR-411-3p mimic组，（5）SiO2+miR-NC组、SiO2+miR-411-3p mimic组。组织形态学染色观察肺组织病理形态变化及胶原沉积；实时荧光定量PCR、蛋白质免疫印迹法检测miR-411-3p及相关蛋白表达；免疫共沉淀（Co-IP）法检测SMURF2/Smad7及Smad7/泛素（Ub）结合情况；双荧光素酶报告基因实验验证miR-411-3p对Smurf2基因调节作用。结果SiO2诱导的MLE-12细胞中，与对照组比，SiO2组中N-钙黏蛋白（N-Cad）、I型胶原（CoL I）、SMURF2、转化生长因子-β1（TGF-β1）及磷酸化Smad2/3（p-Smad2/3）表达均明显上调；而E-钙黏蛋白（E-Cad）、Smad7及miR-411-3p表达明显降低（P＜0.05）；双荧光素酶报告基因显示miR-411-3p对Smurf2有调节作用（P＜0.05）；同时，miR-411-3p mimic下调N-Cad、CoL I、SMURF2、TGF-β1及p-Smad2/3蛋白表达，而上调E-Cad、Smad7表达蛋白表达（P＜0.05）；而沉默Smurf2基因可抑制N-Cad、CoL I及p-Smad2/3蛋白表达，同时促进E-Cad、Smad7蛋白表达（P＜0.05）；Co-IP实验显示，在SiO2诱导下SMURF2与Smad7结合增强，同时Smad7的泛素结合能力增强。苏木精-伊红（HE）和天狼星红染色显示，miR-411-3p agomir减少小鼠肺组织矽结节面积及胶原沉积，同时N-Cad、CoL I、SMURF2、TGF-β1及p-Smad2/3蛋白表达显著下调，E-Cad、Smad7蛋白表达显著上调（P＜0.05）。结论miR-411-3p 通过抑制SMURF2/Smad7泛素化降解，减轻小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质转化，拮抗小鼠矽肺纤维化进展。

关键词：矽肺, 肺纤维化, 上皮-间质转化, miR-411-3p, SMURF2/Smad7泛素化,