circCCDC138在炭黑纳米粒子诱导人肺上皮细胞早期恶性转化中的作用

来源：环境与职业医学杂志 2025年第4期北京时间：

作者：李润锋, 马丽纯, 覃舒琳, 刘雯,

摘要：背景随着炭黑纳米粒子（CBNPs）的大规模生产和应用，职业和人群暴露呈明显上升趋势。相关研究表明，CBNPs暴露会诱导氧化应激、炎症和DNA损伤。目的构建CBNPs暴露诱导的人肺上皮细胞（BEAS-2B）恶性转化细胞（C-BEAS-2B）模型，探究circCCDC138在CBNPs诱导BEAS-2B细胞恶性转化过程中的作用和机制。方法设置0、10、20、40、80 μg·mL−1 CBNPs染毒剂量，采用CCK8试验检测细胞活力；将BEAS-2B细胞暴露于20 mg·mL−1 CBNPs 3个月，构建CBNPs诱导的BEAS-2B细胞恶性转化模型；采用细胞划痕和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力；采用定量PCR检测BEAS-2B细胞和C-BEAS-2B细胞中circCCDC138的表达量，并通过消化抗性试验验证其稳定性；构建干扰、过表达circCCDC138的细胞模型，采用定量PCR检测细胞中circCCDC138的表达量，通过流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡情况；采用Western blot分析相关细胞中p53蛋白的表达量。结果电镜下CBNPs为球形颗粒，呈现链状结构。20 μg·mL−1 CBNPs染毒条件下BEAS-2B活力的降低相对较小（10%）。与对照组细胞相比，20 μg·mL−1 CBNPs暴露组在24 h、48 h表现出更明显的细胞迁移和侵袭能力，表明CBNPs暴露诱导了BEAS-2B细胞早期恶性转化（P<0.01）。测定暴露于CBNPs后0、7、15、30 d的C-BEAS-2B中circCCDC138的表达量，提示circCCDC138上调且呈时间依赖性增加。与C-BEAS-2B细胞相比，过表达circCCDC138的C-BEAS-2B细胞表现出S期进展受阻（36.9%）与凋亡抗性增加（P<0.01），同时细胞中p53蛋白表达下调（P<0.01），而干扰circCCDC138的C-BEAS-2B细胞则出现相反的结果（P<0.01）。结论持续暴露于CBNPs（20 μg·mL−1）的BEAS-2B细胞具有显著增强的迁移和侵袭能力，表现出早期恶性转化特性。circCCDC138在C-BEAS-2B细胞中呈高表达，具有RNase R消化抗性，并随CBNPs暴露呈时间依赖性增加且可能通过抑制p53蛋白表达来促进细胞恶性转化。

关键词：炭黑纳米粒子, BEAS-2B, <i>circCCDC138</i>, p53,