miR-130a-3p靶向PPAR-γ对肺上皮间质转化的影响在矽肺纤维化中的作用

来源：环境与职业医学杂志 2025年第2期北京时间：

作者：郝小惠, 李倩, 靳宜璇, 张秦欣, 王渝迪, 杨方,

摘要：背景目前矽肺病的治疗措施仍然有限，缺乏彻底治愈方法。微小 RNA（miRNAs）通过直接降解靶基因mRNA或抑制其翻译，在转录水平参与纤维化疾病进程。 然而miR-130a-3p如何调控矽肺纤维化仍未完全阐明。目的探讨miR-130a-3p是否通过抑制过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）基因促进上皮间质转化，进而促进矽肺纤维化进程，以寻找矽肺治疗有效新靶点。方法（1）动物实验：10 mg 二氧化硅（SiO2）溶于100 µL生理盐水制成混悬液，一次性注入C57BL/6J小鼠的气管内制作模型，SiO2暴露后28 d为矽肺组；对照组气管内注入等量的生理盐水。苏木素-伊红和天狼猩红染色观察肺组织病理学变化和胶原沉积。实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测肺组织的miR-130a-3p和PPAR-γ的mRNA表达水平。Western blotting检测肺组织的PPAR-γ、转化生长因子（TGF）-β1、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原蛋白（Collagen Ⅰ）蛋白的表达水平。（2）细胞实验：5 µg·L−1的TGF-β1刺激小鼠肺泡上皮细胞（MLE-12）不同时间（0、12、24、48 h）。RT-qPCR检测细胞miR-130a-3p和PPAR-γ的mRNA表达。双荧光素酶报告基因实验检测MLE-12细胞内miR-130a-3p和PPAR-γ的mRNA的结合。转染miR-130a-3p抑制剂后5 µg·L−1的TGF-β1刺激MLE-12细胞，Western blotting检测细胞内PPAR-γ、E-cadherin和α-SMA蛋白表达。结果（1）矽肺模型组小鼠肺泡间隔增宽、肺内矽结节形成，红染的胶原沉积于矽结节内表明矽肺纤维化模型建立成功。 肺组织TGF-β1、α-SMA及Collagen Ⅰ蛋白表达增高， E-cadherin和PPAR-γ蛋白表达降低（P <0.05或P <0.01）。肺组织miR-130a-3p表达增高，PPAR-γ的mRNA表达降低（P<0.01）。（2）TGF-β1刺激MLE-12细胞后miR-130a-3p表达增高，PPAR-γ的mRNA表达降低（P<0.05或P<0.01）。双荧光素酶报告基因检测显示在MLE-12细胞中miR-130a-3p和 PPAR-γ的mRNA存在直接作用关系。转染miR-130a-3p抑制剂可抑制TGF-β1刺激的MLE-12细胞内PPAR-γ、E-Cadherin蛋白表达的降低和α-SMA蛋白表达的增高（P<0.05或P<0.01）。结论miR-130a-3p通过靶向降低PPAR-γ的表达，增加肺上皮间质转化进而促进矽肺纤维化发生发展。

关键词：矽肺, <i>miR-130a-3p</i>, 过氧化物酶增殖物激活受体γ, 上皮间质转化, 纤维化,