次氯酸钠消毒剂对人支气管上皮细胞的毒性效应

来源：环境与职业医学杂志 2024年第7期北京时间：

作者：李佳威, 刘江正, 郭晓洁, 涂永梅, 师敏婕, 李文丽, 卢金锁,

摘要：背景在不同的环境空气中存在着多种微生物，一旦易感人群与环境中的致病微生物接触，很容易被感染。为避免致病菌的传播，采取消毒的方式将环境中的致病菌杀死以阻断致病菌与人类接触，是目前最简单有效的办法。次氯酸钠（NaClO）是目前应用最广泛的消毒剂，然而NaClO应用于环境空气消毒的安全性尚不明确。目的建立NaClO诱导支气管上皮细胞（BEAS-2B）损伤模型，探讨NaClO消毒剂对BEAS-2B细胞的毒性作用机制。方法将 100 mmol·L−1 NaClO 标准溶液用 0.9% NaCl溶液梯度稀释至0、25、50、100、200、400 μmol·L−1 处理细胞，分别在 15、30 min后细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测细胞活性，选择0、25、50 μmol·L−1 NaClO处理的细胞在倒置显微镜下观察细胞形态，流式细胞术 Annexin V FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况，确定最终实验浓度。透射电镜观察线粒体等细胞器的形态，JC-1染色检测细胞线粒体膜电位，Fluo-4 AM荧光探针法检测细胞内Ca2+浓度，2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针检测细胞总活性氧（ROS），二氢乙锭（DHE）荧光探针检测细胞线粒体ROS，试剂盒检测脂质过氧化中间产物丙二醛（MDA）。结果与0 μmol·L−1 NaClO处理组细胞相比，25 μmol·L−1 NaClO处理30 min后细胞形态变化不大，50 μmol·L−1 NaClO处理30 min后细胞活力下降至正常细胞活力的70%（P<0.01），细胞形态开始皱缩变圆，最终选择50 μmol·L−1 NaClO处理30 min作为后期实验浓度。实验结果发现，与0 μmol·L−1 NaClO处理组细胞相比，NaClO处理组凋亡细胞数量增加（P<0.05），线粒体膜电位降低（P<0.01），细胞内Ca2+浓度升高（P<0.05），细胞ROS水平升高（P<0.05），线粒体ROS水平升高（P<0.01），MDA含量升高（P<0.01）。结论本研究成功建立了NaClO诱导BEAS-2B细胞损伤模型，并发现NaClO可通过诱导BEAS-2B细胞凋亡和氧化应激导致细胞损伤。根据结果推测可能的原因有2种，一是NaClO溶于水形成次氯酸（HClO），HClO具有氧化性，进入细胞后使细胞内ROS水平升高，导致细胞氧化应激。二是HClO进入细胞直接攻击线粒体膜，导致线粒体膜内外电位失衡，Ca2+外流引起细胞凋亡。

关键词：消毒, 次氯酸钠, 人支气管上皮细胞, 凋亡, 氧化应激,