let-7c参与肺泡巨噬细胞M2极化在煤矿粉尘致大鼠肺组织上皮-间质转化中的作用

来源：环境与职业医学杂志 2024年第6期北京时间：

作者：王茹, 卢丽媛, 李萌, 刘洋, 贺小玉, 张慧芳,

摘要：背景煤工尘肺（CWP）是一种危害严重的职业性肺病，是我国法定职业病之一。上皮-间质转化（EMT）参与尘肺病肺组织弥漫性纤维化，其机制可能与let-7c调控巨噬细胞极化有关。目的通过动物体内实验，探讨let-7c参与巨噬细胞极化在不同含量游离SiO2的煤矿粉尘致大鼠肺组织EMT中的作用。方法将SD大鼠随机分为对照组、5% SiO2组、30% SiO2组和99.9% SiO2组，每组16只。各组大鼠分别气管滴注100 μL 20 mg·mL-1混悬液（5% SiO2、30% SiO2、99.9% SiO2）或生理盐水，并在1、3个月时，收集支气管肺泡灌洗液。采用免疫荧光检测肺泡巨噬细胞（AMs）中M1标志物（CD86）或M2标志物（CD206）相对表达水平。采用苏木素-伊红（HE）染色和Masson染色观察肺组织炎症和纤维化。采用蛋白质免疫印迹法检测转化生长因子-β1（TGF-β1）、E-钙黏连蛋白及波形蛋白表达水平；采用荧光定量PCR检测let-7c、c/EBP-δ基因表达水平。结果HE及Masson染色结果显示：与对照组相比，随着染尘时间的增加，5% SiO2组、30% SiO2组和99.9% SiO2组大鼠肺组织纤维化程度逐渐加重。与对照组相比，5% SiO2组、30% SiO2组和99.9% SiO2组大鼠CD86、CD206的表达在1个月时均逐渐增加（F=330.904、146.801，P<0.05），3个月时各组CD86的表达逐渐减少（F=331.781，P<0.05），而CD206的表达增加（F=1164.190，P<0.05）。1个月时，5% SiO2组、30% SiO2组和99.9% SiO2组TGF-β1（F=8.847，P<0.05）及波形蛋白（F=13.275，P<0.05）表达逐渐增加，E-钙黏连蛋白（F=6.253，P<0.05）表达逐渐减少；3个月时，各组TGF-β1（F=16.833，P<0.05）及波形蛋白（F=55.021，P<0.05）表达增加，E-钙黏连蛋白减少（F=12.790，P<0.05）。PCR结果显示：与对照组相比，5% SiO2组、30% SiO2组和99.9% SiO2组let-7c mRNA的表达在1个月和3个月时均增加（F=11.251、28.136，P<0.05）；各组c/EBP-δ mRNA的表达在1个月和3个月时均减少（F=49.204、177.090，P<0.05）。结论在粉尘刺激下，let-7c通过调节巨噬细胞极化促进EMT的发生，从而参与肺纤维化的形成，进而影响CWP的进展。

关键词：煤工尘肺, <i>let-7c</i>, 巨噬细胞极化, 上皮-间质转化, 游离二氧化硅,