天然除虫菊素诱导人肝细胞DNA氧化损伤研究

来源：环境与职业医学杂志 2024年第6期北京时间：

作者：杨韵, 应梦超, 孙静秋, 沙毅杰, 洪新宇, 肖萍, 陶功华,

摘要：背景天然除虫菊素被广泛应用于环境和家庭卫生领域。研究显示，其具有潜在的肝脏毒性，但具体机制尚不明确。目的探讨天然除虫菊素对人肝细胞DNA损伤的影响。方法本研究以人肝细胞QSG7701为体外测试模型，以未处理细胞为对照组，以经系列质量浓度（后称浓度）（5、10、20和40 μg·mL−1）天然除虫菊素暴露6 h或24 h后作为处理组。分别采用荧光探针法经荧光显微镜检测细胞活性氧（ROS）的荧光强度；采用比色法经酶标仪检测细胞内硫代巴比妥酸反应物质（TBARS）的水平；采用彗星电泳试验镜下观察DNA断片迁移以检测DNA损伤程度；采用免疫荧光试验通过激光共聚焦对细胞磷酸化H2AX（γH2AX）及8-氧鸟嘌呤（8-oxoG）水平等指标进行检测。结果随着天然除虫菊素浓度的升高，ROS荧光强度呈剂量依赖性升高，与对照组相比，10 μg·mL−1及以上浓度组差异均有统计学意义（P<0.01），其中20 μg·mL−1和40 μg·mL−1处理组ROS水平是对照组的2.17和3.05倍；TBARS水平随着天然除虫菊素浓度升高而升高（P<0.01），20 μg·mL−1和40 μg·mL−1天然除虫菊素处理组的TBARS水平是对照组2.46和3.01倍；彗星试验结果显示，各浓度组细胞DNA呈现不同程度的拖尾，随着天然除虫菊素暴露浓度的增高，尾部DNA含量（TDNA%）、尾长（TL）、尾矩（TM）和Olive尾矩（OTM）等指标呈剂量依赖性增高，与对照组相比，20 μg·mL−1及以上浓度组差异均有统计学意义（P<0.01），其中40 μg·mL−1浓度组TDNA%、TL、TM及OTM指标分别为（46.92 ± 3.52）%、（64.67 ± 4.16）μm、30.96 ± 2.94和22.64 ± 3.89。细胞免疫荧光结果显示天然除虫菊素可诱导γH2AX和8-oxoG的形成，且荧光强度呈剂量依赖性增高，与对照组相比，在10 μg·mL−1及以上浓度组相对荧光强度的增高均有统计学意义（P<0.01）。结论天然除虫菊素可诱导人肝细胞DNA损伤，且ROS介导的氧化应激可能在其诱导的肝细胞遗传毒性中发挥了重要作用。

关键词：天然除虫菊素, 人肝细胞, 活性氧, 氧化应激, DNA损伤, 遗传毒性,