不同浓度鸦胆子苦醇对小鼠矽肺纤维化的影响

来源：环境与职业医学杂志 2024年第5期北京时间：

作者：康慧敏, 李柔, 王汉钦, 郑云帆, 陈适,

摘要：背景矽肺是一种肺部弥漫性纤维化疾病，由长期暴露于游离二氧化硅（SiO2）粉尘引起，发病机制复杂，缺乏有效的治疗。鸦胆子苦醇（Bru）具有多种生物活性，其在矽肺纤维化中的作用尚不明确。目的探究不同浓度Bru对SiO2诱导小鼠矽肺纤维化的影响。方法将30只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、矽尘组、Bru低剂量（1 mg·kg−1）组、Bru中剂量（2 mg·kg−1）组、Bru高剂量（4 mg·kg−1）组，每组6只；除对照组外，其余各组均采用一次性非气管暴露法滴注50 μL、60 mg·mL−1 SiO2悬浊液建立矽肺小鼠模型，对照组滴注等量生理盐水；Bru组于染尘的同时腹腔注射Bru，连续注射5 d，随后隔天注射，染尘28 d后处死小鼠，收集肺组织。测定小鼠肺系数；采用苏木精-伊红（HE）染色和Masson染色观察小鼠肺组织的病理变化；Western blot法检测小鼠肺组织中凋亡蛋白Cleaved-caspase 3、纤维化相关蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、I型胶原蛋白（Col-I）、自噬相关蛋白Beclin1、微管相关蛋白1轻链3（LC3）、Sequestosome 1（p62/SQSTM1）蛋白、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Keap1），核因子E2相关因子2（Nrf2）的表达水平；实时荧光定量逆转录PCR（RT-qPCR）检测小鼠肺组织中Caspase 3、α-SMA和Col-ImRNA水平。结果与对照组相比，矽尘组小鼠的肺系数明显升高（P<0.01）；肺组织中肺泡壁受损，出现炎性细胞浸润、纤维结节和胶原纤维沉积；Cleaved-caspase 3、α-SMA和Col-I的蛋白表达及转录水平均明显上调（P<0.01）；Beclin1、LC3-Ⅱ/I、p62、Nrf2表达水平增加（P<0.05，P<0.01），而Keap1表达水平下降（P<0.05）。与矽尘组相比，Bru低、中剂量组小鼠肺系数降低（P<0.05）；肺组织的病理损伤及胶原沉积明显改善；Cleaved-caspase 3、α-SMA和Col-I的蛋白表达及转录水平下降（P<0.05，P<0.01），Beclin1、LC3-Ⅱ/I、p62、Nrf2表达水平也均明显下降（P<0.05，P<0.01），中剂量组Keap1水平上升（P<0.05）。与矽尘组相比，Bru高剂量组肺系数、病理损伤、Cleaved-caspase 3、α-SMA和Col-I的蛋白表达及转录水平差异无统计学意义（P>0.05）；Beclin1、LC3-Ⅱ/I及Nrf2表达水平降低（P<0.01），p62蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05），Keap1蛋白水平上升（P<0.01）。结论低、中剂量Bru可能通过Keap1-Nrf2通路调控自噬，改善自噬降解障碍，降低矽肺小鼠的肺系数，减轻矽肺小鼠肺组织中的细胞凋亡，延缓矽肺纤维化的进展。

关键词：矽肺, 鸦胆子苦醇, 肺纤维化, 自噬, 凋亡,