环状RNA hsa_circUCK2参与调控二氧化硅致肺纤维化进程

来源：环境与职业医学杂志 2024年第4期北京时间：

作者：张聪, 罗薇, 王莎, 巢杰,

摘要：背景肺纤维化疾病目前早期缺少筛查诊断方法，后期缺乏特效治疗措施，因此急需探究其机制并开发针对性的治疗方法。目的筛选病理条件下差异表达的环状RNA（circRNA）hsa_circUCK2的表达情况，探究其对肺纤维化的影响。方法在细胞实验中，使用小干扰RNA（siRNA）敲除HPF-a细胞中hsa_circUCK2，TGF-β1刺激HPF-a细胞，设立si-NC组、si-circUCK2组、si-NC+TGF-β1处理组、si-circUCK2+TGF-β1处理组4组，Western blot法检测4组HPF-a细胞中纤连蛋白（FN1）表达情况，划痕实验检测HPF-a细胞迁移能力，CCK-8实验检测TGF-β1刺激的2组（si-NC+TGF-β1处理组和si-circUCK2+TGF-β1处理组）HPF-a细胞活性。在动物实验中，健康SPF级雄性C57BL/6小鼠48只，随机分为生理盐水+si-con组，生理盐水+si-circ_0000115组，SiO2+si-con组，SiO2+si-circ_0000115组4组。mmu_circ_0000115是hsa_circUCK2的小鼠同源基因，气管滴注siRNA敲除小鼠肺circRNA mmu_circ_0000115，48 h后通过气管滴注SiO2悬液（0.2 g·kg−1，50 mg·mL−1）构建小鼠肺纤维化模型，实时荧光定量PCR检测小鼠各脏器中敲除效率，Western blot检测肺组织中I型胶原α2蛋白（COL1A2）表达情况，天狼星红检测肺组织中胶原合成情况。结果在细胞实验中，Western blot结果显示，敲除hsa_circUCK2可下调TGF-β1刺激的HPF-a细胞中FN1的表达水平（P<0.05）；CCK-8实验和细胞划痕实验结果显示，hsa_circUCK2基因的下调可以抑制HPF-a细胞的增殖和迁移（P<0.01）。在动物实验中，实时荧光定量PCR结果显示，在各脏器中只有肺组织中被显著敲除mmu_circ_0000115（P<0.0001）；Western blot结果表明，与SiO2+si-con组相比，敲低mmu_circ_0000115可以降低COL1A2蛋白表达水平（P<0.0001）；天狼星红结果显示，敲低mmu_circ_0000115后，模型组小鼠肺组织中胶原的产生和沉积减少。结论敲低hsa_circUCK2抑制成纤维细胞活化和减少肺纤维化模型小鼠中胶原沉积。提示hsa_circUCK2参与肺纤维化进程，可能是肺纤维化的潜在治疗靶点。

关键词：环状RNA, 转录组芯片, <i>hsa_circUCK2</i>, 肺纤维化, 人肺成纤维-成人细胞,