NaAsO2染毒HaCaT细胞中丝氨酸合成途径关键酶的表达及其作用
来源：环境与职业医学杂志 2022年第5期北京时间：
作者：李凤敏, 韩进美, 黄红茜, 王娜, 张爱华, 韩雪,
摘要：背景 丝氨酸合成途径（SSP）关键酶在肿瘤的生长、增殖、侵袭中发挥重要作用，但其在砷致癌中的作用尚不明确。 目的 以人永生化皮肤角质形成细胞（HaCaT细胞）和NaAsO2所致恶性转化HaCaT（T-HaCaT）细胞为研究对象，观察NaAsO2染毒对SSP关键酶如磷酸甘油酸脱氢酶（PHGDH）、磷酸丝氨酸转氨酶1（PSAT1）和磷酸丝氨酸磷酸酶（PSPH）表达及对细胞增殖、迁移能力的影响，探讨SSP关键酶在砷致癌中的作用。 方法 （1）取课题组前期构建的T-HaCaT细胞，实验分组为传代对照（0 μmol·L−1 NaAsO2）组、T-HaCaT（0.5 μmol·L−1 NaAsO2）组、NCT503（PHGDH抑制剂，25 μmol·L−1）组、NCT503（25 μmol·L−1）+T-HaCaT（0.5 μmol·L−1 NaAsO2）组。Western blotting法检测传代对照组和T-HaCaT组细胞的SSP关键酶蛋白表达水平，CCK8法和细胞划痕试验分别检测各组细胞的增殖率和迁移率。（2）取生长良好的对数生长期HaCaT细胞，以0、0.625、1.25和2.5 μmol·L−1 NaAsO2染毒细胞0、24、48和72 h，检测细胞增殖率和SSP关键酶的蛋白表达水平。后续实验给予HaCaT细胞25 μmol·L−1 NCT503预处理6 h后，用2.5 μmol·L−1 NaAsO2继续染毒72 h，实验分组为对照（0 μmol·L−1 NaAsO2）组、染毒（2.5 μmol·L−1 NaAsO2）组、预处理组（25 μmol·L−1 NCT503）、预处理（25 μmol·L−1 NCT503）+染毒（2.5 μmol·L−1 NaAsO2）组，检测各组细胞的增殖率。 结果 T-HaCaT组细胞中PHGDH的蛋白表达水平是传代对照组的1.60倍（PPP2染毒72 h后HaCaT细胞的增殖率随染毒浓度的增加而增加（r=0.862，PP−1 NaAsO2 染毒后的HaCaT细胞增殖率随染毒时间的延长而增加（r=0.775，PP 结论 SSP关键酶可能在NaAsO2所致的T-HaCaT细胞增殖中扮演重要的角色。
关键词：磷酸甘油酸脱氢酶, 磷酸丝氨酸氨基转移酶, 磷酸丝氨酸磷酸酶, 亚砷酸钠, HaCaT细胞, NaAsO<sub>2</sub>所致的恶性转化HaCaT细胞,
